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睿創生物的常用方法及原理免費代測

2023-04-11 [780]

主營產品:

天津睿創生物Elisa試劑盒系列

ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒ELISA Kit酶聯免疫試劑盒酶聯免疫吸附測定試劑酶聯免疫分析試劑盒酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒酶聯免疫吸附測定試劑盒等。

ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。

Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。

可檢測種屬

(人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細胞,土壤等動植物)

可以檢測樣為

(血清,血漿,唾液,尿液,組織,細胞上清,裂解液等)

產品檢測目的:

樣本水平表達(定量檢測,定性檢測,酶活性檢測)

規格:96T 可以檢測89個樣  48T可以檢測41個樣

備注:6個標準一個空白對照

有效期:6個月 保存2-8°C

elisa試劑盒的優點:

一、高效、靈敏、特異的抗體;

二、穩定的重復性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;

五、最大限度的節省實驗經費。

常用方法及原理如下:

1. 夾心法:

夾心法常用于檢測大分子抗原,一般的操作步驟為:

a. 將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體

b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

c. 洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結

d. 洗去多余未鍵結一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結

e. 洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果

原理:針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。

2. 間接法

間接法常用于檢測抗體,一般的操作步驟為:

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。

c. 洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結。

d. 洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。

原理:利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體。

3. 競爭法

競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制,一般用于檢測小分子抗原,天津睿創生物其操作步驟為:

a. 將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體

b. 加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結,由于塑膠孔盤上固著的抗體數量有限,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結,即所謂競爭法之由來。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。

e. 當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時,一般會考慮使用競爭法ELISA

原理:將特異性抗體包被于固相載體表面,經洗滌后分成兩組:一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液,另一組只加酶標記抗原,經孵育洗滌后加底物顯色,這兩組底物降解量之差,即為所要測定的未知抗原的量。

天津睿創生物免費代測服務

天津睿創生物"始終以"提供好的質量給客戶,為客戶的利益服務"為理念。拓展頂尖的產品研發與經驗豐富的技術團隊,致力于創新產品的研發。目前,實驗室占地約800平米,內設先進實驗儀器設備,能夠完成ELISA檢測、PCR擴增、免疫學檢測等各類生物學實驗。天津睿創生物經過10年ELISA試劑盒技術的積累與沉淀,不斷創新突破,努力將中國生命科學研究提升到全新的高度!

凡購買本公司目錄任何一種酶聯免疫檢測試劑盒,您只需將需要檢測的動物(Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……)種類和檢測指標(白介素類、激素類)及標本數量(48T/96T)通知公司業務員即可。

免費代測服務樣本要求:
在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請造模取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質量,所以避免反復凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書,具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。

免費代測服務液體類標本:標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。

血 清: 室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。

血 漿: 應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心

尿液、胸腹水、腦脊液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。

細胞培養上清: 檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.0-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

組織標本: 切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

天津睿創生物標本時需注明以下情況:
1、標本編號
2、所測項目
3、是否做復孔
4、實驗后標本是否寄回




津公網安備 12010302002413號

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